酶工程作為一門(mén)應(yīng)用性學(xué)科,是生物技術(shù)的重要組成部分。通過(guò)本課程的學(xué)習(xí),使學(xué)生掌握酶工程的基本原理、基本工藝和基本的實(shí)驗(yàn)操作技能,了解該學(xué)科的發(fā)展方向,能夠理論聯(lián)系實(shí)際去分析和解決有關(guān)發(fā)酶工程中的具體問(wèn)題,從而提高科學(xué)研究和設(shè)計(jì)的能力。
二、基本教學(xué)內(nèi)容與學(xué)時(shí)安排
1.酶學(xué)基本理論(2學(xué)時(shí))
酶催化作用的特點(diǎn)
影響酶催化的因素
底物濃度的影響
酶濃度的影響
溫度的影響
pH值的影響
抑制劑和激活劑的影響
酶的分類(lèi)與命名
蛋白類(lèi)酶(P酶)的分類(lèi)與命名
核酸類(lèi)酶(R酶)的分類(lèi)與命名
2.酶的活力測(cè)定 (2學(xué)時(shí))
酶活力測(cè)定方法
酶活力單位
酶的轉(zhuǎn)換數(shù)與催化周期
固定化酶的活力測(cè)定
酶的生產(chǎn)
微生物發(fā)酵產(chǎn)酶
產(chǎn)酶微生物
發(fā)酵生產(chǎn)提高酶產(chǎn)量的措施
酶生物合成的模式
固定化微生物細(xì)胞發(fā)酵產(chǎn)酶
3.動(dòng)、植物細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)酶(2學(xué)時(shí))
植物細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)酶
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)酶
酶的提取與分離純化
酶的提取
細(xì)胞破碎
酶的提取
4.酶的分離純化 (2學(xué)時(shí))
沉淀分離
離心分離
過(guò)濾與膜分離
層析分離
電泳分離
萃取分離
結(jié)晶
濃縮與干燥
5.酶分子修飾 (2學(xué)時(shí))
金屬離子置換修飾
大分子結(jié)合修飾
酶分子的側(cè)鏈基團(tuán)修飾
肽鏈有限水解修飾
6.核苷酸鏈剪切、置換修飾 (2學(xué)時(shí))
核苷酸剪切修飾
核苷酸置換修飾
氨基酸置換修飾
酶分子的物理修飾
酶分子修飾的應(yīng)用
在酶學(xué)研究方面的應(yīng)用
在醫(yī)藥方面的應(yīng)用
7.在工業(yè)方面的應(yīng)用 (2學(xué)時(shí))
在抗體酶研究開(kāi)發(fā)方面的應(yīng)用
在核酸類(lèi)酶人工改造方面的應(yīng)用
在有機(jī)介質(zhì)酶催化反應(yīng)中的應(yīng)用
酶分子的定向進(jìn)化
概述
簡(jiǎn)介
歷史
8.定向進(jìn)化的策略 (2學(xué)時(shí))
易錯(cuò)PCR技術(shù)為代表的無(wú)性進(jìn)化
DNA改組技術(shù)為代表的有性進(jìn)化
基因家族之間的同源重組
外顯子改組
雜合酶
計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)
突變庫(kù)的構(gòu)建及應(yīng)用
定向進(jìn)化的應(yīng)用
提高酶分子的催化活力
提高酶分子穩(wěn)定性的定向進(jìn)化
適應(yīng)人工環(huán)境中提高酶活力或穩(wěn)定性的進(jìn)化
提高底物專(zhuān)一性合增加對(duì)新底物催化活力的進(jìn)化
對(duì)映體選擇性的定向進(jìn)化
變換催化反應(yīng)專(zhuān)一性
9.酶的固定化 (2學(xué)時(shí))
酶固定化
酶的固定化方法
固定化酶的特點(diǎn)
固定化酶的應(yīng)用
細(xì)胞固定化
細(xì)胞固定化的方法
微生物細(xì)胞固定化
植物細(xì)胞固定化
10.酶反應(yīng)器 (2學(xué)時(shí))
酶反應(yīng)器的類(lèi)型
攪拌罐式反應(yīng)器
填充床式反應(yīng)器
流化床反應(yīng)器
鼓泡式反應(yīng)器
膜反應(yīng)器
噴射式反應(yīng)器
酶反應(yīng)器的選擇
根據(jù)酶的反應(yīng)形式選擇反應(yīng)器
根據(jù)酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)性質(zhì)選擇反應(yīng)器
根據(jù)底物或產(chǎn)物的理化性質(zhì)選擇反應(yīng)器
11.酶反應(yīng)器的設(shè)計(jì) (2學(xué)時(shí))
確定反應(yīng)器的類(lèi)型
確定酶反應(yīng)器的制造材料
進(jìn)行熱量衡算
進(jìn)行物料衡算
酶反應(yīng)器的操作
酶反應(yīng)操作條件的確定及其調(diào)控
酶反應(yīng)器操作的注意事項(xiàng)
12.酶的應(yīng)用 (2學(xué)時(shí))
酶在醫(yī)藥方面的應(yīng)用
酶在食品方面的應(yīng)用
酶在輕工、化工方面的應(yīng)用
酶在環(huán)境保護(hù)方面的應(yīng)用
酶在生物技術(shù)領(lǐng)域的應(yīng)用
教材:新編生物工藝學(xué)(上下冊(cè)).俞俊棠等. 化學(xué)工業(yè)出版社,2003年
酶工程(第二版).郭勇. 科學(xué)出版社,2004年
參考書(shū):
1. 微生物工程. 曹軍衛(wèi)等. 科學(xué)出版社, 2002年
2. 生化生產(chǎn)工藝學(xué).梅樂(lè)和等主編. 科學(xué)出版社,1999年
3. 微生物工程工藝原理.姚汝華主編. 華南理工大學(xué)出版社,1996年
4. 生物工藝學(xué)(上下冊(cè)).俞俊棠等主編. 華東理工大學(xué)出版社,1998年
5. Principles of Fermentation Technology. (2nd Edition),
Peter F. Stanbury, Allan Whitaker, Stephen J. Hall.Pergamon, 1995
6. 酶的生產(chǎn)與應(yīng)用.郭勇.化學(xué)工業(yè)出版社. 2003年
7. 酶工程.羅貴民.化學(xué)工業(yè)出版社,2002年
8. 微生物酶轉(zhuǎn)化技術(shù).宋欣.化學(xué)工業(yè)出版社, 2005年