作? Michael Kaszuba and Pauline Carnell, 马尔文A器公?
为成功实现药物传输，理想的途径是将ȝ制剂靶向传输x需位置Q实现对受药l织与药物间怺作用的监。可q泛q用于全w及(qing)局部给药的脂质体对q一应用的需求不断上升。由于具备液体、固体、半Z配方能力Q脂质体已应用于针对真菌感染、甲肝、急性淋巴细?yu)白血病等疄的治疗实践中。脂质体的物理表征对配方改良?qing)研发具有十分重要的意义。本文将探讨两项相关辅助技术的成功应用Q一是用于检脂质体_度分析的纳c粒子跟t分析技术（NTAQ，二是用于量脂质体粒度及(qing)zeta?sh)位的光散射Q动态电(sh)泻I技术?
能够“定位”的l药载体
脂质体由脂质双分子层构成Q是一Uh工制备的球Ş囊。最初应用于研究膜结构渗透性的模型pȝ中。由于脂质体既能水溶性物质包于其囊泡中Q又能将Ҏ(gu)性物质包于其脂双层内，q年来对它的研究主要集中在其作ؓ(f)l药载体的适用性。通过控制其脂质构成ƈ/或者进行表面改性，研究人员q能够针对具体的应用对脂质体q行设计。脂质体分ؓ(f)单室脂质体和多室脂质体，h生物降解性，基本无毒性，q可以制成不同粒度。既能蝲荷亲水物质，也能载荷疏水物质的特性脂质体具有广泛的应用领域。此外，例如通过d抗体或肽铄物质q行表面Ҏ(gu)，脂质体能使药物靶向达C内指定区域，或者g长体内药效的作用旉。这些特性促使许多研Ih员选择脂质体作物蝲体?
脂质体应用广泛，其在制药领域的应用包括：(x)保护ȝ药剂不受胃肠环境影响Q促q药物成分在胃肠道内的传输，定向控释药物至特定位|，q能促进溶解以及(qing)增加l胞(yu)对药物的吸收。与此同Ӟ脂质体制剂的局部外用功能也引v了医药及(qing)化妆品行业的强烈x。脂质体实现药物微粒靶向传输的机理包括扩散和直接l胞(yu)融合Q其中后者更为常见。在直接l胞(yu)融合中，脂质体的脂双层可与其他双分子层（如细?yu)膜Q融合，从而将脂质体的内含物传输至目标l胞(yu)?
物理表征作用
脂质体的效用与其物理Ҏ(gu)密切相兟뀂测量和分析脂质体制剂的_度、浓度、zeta?sh)位{参数有助于预估制剂在(f)床环境下的效用。在q些参数中，脂质体的_度?qing)分布尤为重要，其是在肺部或非肠道途径l药的情况下Q粒度对药物zL成分的有效传输起到了关键作用。除体内作用外，脂质体的_度q具有一pd体外意义Q会(x)对给药系l的载药能力、聚集程度和沉积状况{诸多方面生媄响。而另一个重要的指标是zeta?sh)位的数值测量，该测量技术已q泛应用于胶体系l的E_性预。在应用于脂质体Ӟq一技术能够监体内可能发生的带电(sh)脂质体与相反甉|微_间的相互作用?
提高分析可靠?/strong>
医药配方研发而言Q无论采用何U蝲体、何U配法，必须要有可靠的分析体pL供相关的健全数据。如果用脂质体作体，为实现更高效、更先进的研发进E，需在进行Q何(f)床试验之前，详尽了解q些载体是如何在体内发生作用的，而这其中的关键便是粒度及(qing)zeta?sh)位的测量?
使用U米颗粒跟踪分析技术测量脂质体_度
U米颗粒跟踪分析技术（Uͼ(x)NTAQ运用光散射来检溶液中的纳c颗_。该技术结合了光散显微镜?qing)视频成像技术（图一Q，Ҏ(gu)不同的样本类型，可测?0 -2000 nm范围内的_度?
使用U学数码摄相机可以捕捉溶液中颗粒的散光Q再׃?ni)A器Y仉q踪每个颗粒的移动情况（图二Q?
在对被照样本进行媄像记录后QNTA软g识别ƈ跟踪视野中每一个颗_的布朗q动。数位捕捉到的单个粒子的扩散速率Q速度Q与球体{效体动力直径相关Qƈ能通过以布朗运动ؓ(f)模型的斯托克?爱因斯坦方程计算得出。NTA可逐粒计算_度Q且׃有媄像片D做分析基础Q用戯可以_表征实时状态。个体颗_的_度分布都能在数U内快速获得?
NTA技术也能够对不同的脂质体进行同步的单独分析Q因此除基础的粒度分析以外，qؓ(f)获取额外信息提供了新的途径Q其中包括单个脂质体的相对光散射强度的测定。将数据l果q与另行得的粒度数据绘成坐标图Q?nbsp;可以更加l致地分辨出׃同折率QRIQ或不同材料构成的颗_。这U方法对定脂质体的内含物是否变异非常有用，因ؓ(f)I囊泡的RI值可能低于蝲L(fng)囊。同时作ZU单_子探测pȝQNTAq能量颗粒度?
zeta?sh)位量的应?/strong>
脂质体与l胞(yu)在体内发生交互作用的部位在很大程度上p质体的粒度决定。小_度的脂质体能够通过肝窦犉的膜孔，中粒度的脂质体停留在血液腔室中q能长时间@环流动，而大_度的脂质体则被Kupfferl胞(yu)快速清除。与_度量cMQ了解脂质体制剂的zeta?sh)位有助于预其在h体内的变化?
颗粒的zeta?sh)位是指颗粒在特定媒介中获得的ȝ(sh)荗以基因ȝZQzeta?sh)位的测量可用于优化特定脂质体与不同DNA质粒的比例，从而将配方的聚集度降到最低?
动态光散射(Uͼ(x)DLS)是表征脂质体_度的一较为成熟的技术。此外，能够同时采用动态光散射量_度、ƈ使用Ȁ光多普勒频流速测定zeta?sh)位的分析设备在业内也得到日益广泛的应用?
与NTA技术一Pq子布朗运动生的光散也是DLS技术的核心所在。DLS技术测量散光强度随时间变化生的波动Qƈ认_子的扩散系数。在此基上利用斯托克?爱因斯坦方程数据{化ؓ(f)_度大小分布情况?
采用Ȁ光多普勒频流速测定法量zeta?sh)位Ӟ向分子溶液或微粒分散液施加?sh)场，q些颗粒便会(x)以一定的速率UdQ而该速率与zeta?sh)位相关。通过定该速率能够计算出电(sh)泌UȝQƈ据此出颗粒的zeta?sh)位和zeta?sh)位分布?
使用马尔文A器公司的Zetasizer Nanopȝq行实验Q结果表明：(x)使用DLS_度量技术及(qing)Ȁ光多普勒频流速测量zeta?sh)位同等可靠Q均可适用于阴d脂质体和阳离子脂质体[2]?
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_度?qing)zeta?sh)位可?f)特定医药领域脂质体定性及(qing)研发提供重要的参敎ͼ因而需要相关的表征技术来提供详细的辅助信息，帮助了解脂质体的性态，从而优化药剂定制工艺ƈ实现质量控制。本文介l的技术能够提供脂质体制剂的粒度、浓度、zeta?sh)位{辅助信息。药物配方研I员通过对这些性能的不断论证，促q针对具体的ȝҎ(gu)选用最为合适的脂质体?
参考文?
1. Laouini, A., Jaafar-Maalej, C., Limayem Blouza, S., Charcrosset, C & Fessi, H. Preparation, Characterization and Applications
of Liposomes: State of the Art. Journal of Colloid Science and Biotechnology Vol 1,
147-168.(2012)
2. Size and zeta potential characterization of liposomes using the Zetasizer Nano.
Malvern Instruments Application note http://www.malvern.com/en/support/resource-center/application notes/AN101104ZetaPotentialCharacterizationLiposomes.aspx (Accessed 5 May 2014)
作者简?
Pauline Carnell- 马尔文A器有限公品经理（NanoSightQ?nbsp;
Pauline Carnell奛_毕业于英国利物大学药理学专业。她在药物研I域拥?0多年的丰富经验，曑օ后于英国Warner Lambert公司和辉瑞制药工作，负责研究开发G蛋白偶联受体(GPCR)、离子通道、抗体和蛋白质等目。在加入马尔文A器前QPauline奛_在一家欧z生物技术公司服务了两年Q负责蛋白质l合金纳c粒子研I。Pauline奛_目前主要从事生物应用领域的研IӞ包括l药pȝ、蛋白质聚集、细?yu)外泡和荧光物质的生物应用?nbsp;
Mike Kaszuba-马尔文A器有限公司技术支持经?/strong>
Mike Kaszuba先生拥有英国威尔士理工学院的博士学位Q在校期间曾利用核磁共振技术对脂质体的物理和生化特性进行研I。此后，他l于曼彻斯特大学从事脂质体给药应用的博士后研I?996q_(d)Mike Kaszuba先生加入马尔文A器，担QZetasizerpd讑֤的品技术专员?010q_(d)他被d为技术支持经理，负责总部讑֜英国的品技术专家和应用团队?
