深層細(xì)菌感染(DBIs)具有頑固性和對(duì)組織的深層滲透能力。消除深層頑固細(xì)菌和促進(jìn)組織再生面臨巨大的挑戰(zhàn)。本文設(shè)計(jì)了一種新型的細(xì)菌響應(yīng)水凝膠(SFT-B Gel),可用于DBIs實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)和近紅外二區(qū)深層光熱治療(NIR-II PTT)。以甲基化三嗪(TPT3+)浸染后的絲素蛋白溶液為骨架,與超離液陰離子(B12H122-)通過離液效應(yīng)交聯(lián)形成SFT-B Gel。此外,SFT-B Gel表現(xiàn)出DBIs的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)能力,在細(xì)菌存在的情況下,可以被細(xì)菌原位還原生成TPT2+?自由基。含自由基的SFT-B Gel(SFT-B★ Gel)具有較強(qiáng)的NIR-II吸收和優(yōu)異的光熱效應(yīng),可以快速消除DBIs和促進(jìn)感染組織快速愈合。本研究為利用離液效應(yīng)構(gòu)建具有獨(dú)特性能的智能水凝膠提供了新的途徑。
圖1. 離液效應(yīng)誘導(dǎo)絲素蛋白溶液Sol-Gel轉(zhuǎn)化以及細(xì)菌原位響應(yīng)NIR-II深層光熱抗感染
近期,武漢科技大學(xué)王曉強(qiáng)副教授基于硼簇的離液效應(yīng)開發(fā)了一種具有DBIs實(shí)時(shí)感染監(jiān)測(cè)和NIR-II深層PTT的新型可注射水凝膠(SFT-B Gel)(圖1A)。首先,絲素蛋白(SF)利用靜電相互作用與甲基化三嗪(TPT3+)結(jié)合形成SFT Sol,作為水凝膠前體。然后,通過TPT3+和B12H122-之間的離液效應(yīng)實(shí)現(xiàn)溶膠-凝膠(Sol-Gel)轉(zhuǎn)變,誘導(dǎo)絲素蛋白交聯(lián)。結(jié)果表明,隨著B12H122-水溶液不斷加入到SFT Sol中,可以制備出具有自愈合性能和可注射性的SFT-B Gel(圖1B)。在DBIs中,甲基化TPT3+可以被兼性厭氧菌(如E. coli和S. aureus)原位還原生成自由基形式(TPT2+?),并伴有明顯的顏色變化(從白色變?yōu)楹谏?/span>。超分子晶體通過離液效應(yīng)形成的空間效應(yīng)和自旋密度的離域極大地穩(wěn)定了TPT2+?自由基。SFT-B★ Gel在NIR-II范圍內(nèi)表現(xiàn)出較強(qiáng)的吸收和優(yōu)異的光熱轉(zhuǎn)換效率(38.13%),具有卓越的抗菌效果。此外,SFT-B Gel還可以作為組織工程支架,具有出眾的生物相容性和生物降解能力,有助于促進(jìn)感染組織快速愈合(圖1C)。該工作以“Chaotropic Effect Induced Sol-Gel Transition and Radical Stabilization for Bacteria-Sensitive Near-Infrared Photothermal Therapy”為題發(fā)表在《Nano Letters》期刊上(https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.nanolett.4c00860)。文章共同第一作者是武漢科技大學(xué)李文珍博士以及王子鑫博士。該研究得到國家自然科學(xué)基金、湖北省人才計(jì)劃和煤轉(zhuǎn)化與新型炭材料湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室的支持。
1. 離液效應(yīng)促進(jìn)溶膠-凝膠(Sol-Gel)轉(zhuǎn)化
如圖2B-E所示,通過離液效應(yīng),TPT3+與B12H122-緊密排列,形成塊狀或棒狀的超分子晶體(TPT-B12),而在SFT-B Gel中,TPT-B12的形態(tài)發(fā)生了明顯的變化,形成直徑150 nm球形納米顆粒(圖2F,G),并且在冷凍干燥后觀察到多孔交聯(lián)水凝膠結(jié)構(gòu)(圖2H-J)。
圖2. TPT-B12的單晶X-Ray衍射(SXRD)結(jié)構(gòu)及TPT3+與B12H122-之間的相互作用
2. 細(xì)菌響應(yīng)原位還原與NIR-II光熱效應(yīng)
圖3. 細(xì)菌原位還原SFT-B★ Gel及體外NIR-II(1064nm,0.5 W/cm2)光熱抗菌效果
細(xì)菌響應(yīng)原位還原如圖3A所示,SF Sol、SFT Sol以及SFT-B Gel與細(xì)菌菌液共培養(yǎng)24后,SFT Sol與SFT-B Gel均出現(xiàn)明顯的顏色變化,SFT Sol從白色變?yōu)闇\黃色,而SFT-B Gel從白色變?yōu)楹谏D3B,C所示的紫外-可見(UV-Vis)光譜變化和電子順磁共振(EPR)波譜變化進(jìn)一步說明,共培養(yǎng)后發(fā)生顏色變化是因?yàn)榧谆海?/span>TPT3+)被細(xì)菌原位還原生成TPT2+?自由基形式導(dǎo)致的,且在600~1200 nm范圍內(nèi)具有較強(qiáng)的吸收,在NIR-II激光(1064 nm,0.5 W/cm2)照射下具有顯著的光熱效應(yīng)和光熱穩(wěn)定性(圖3E,F)。基于此,對(duì)SFT-B Gel在NIR-II的PTT抗菌活性進(jìn)行了研究。如圖3G,I所示,SFT-B★ Gel顯示出NIR-II光熱抗菌效果,E. coli和S. aureus抗菌效率分別達(dá)到99%和98%以上。此外,經(jīng)SFT-B★ Gel Light組處理后的細(xì)菌SEM成像顯示,細(xì)菌出現(xiàn)嚴(yán)重的損傷和內(nèi)容物泄漏,說明SFT-B★ Gel在NIR-II激光照射下具有顯著的光熱抗菌能力(圖3H)。這種設(shè)計(jì)不僅實(shí)現(xiàn)了對(duì)細(xì)菌的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)識(shí)別,也為處理DBIs提供了一種潛在的新策略。
3. 組織工程支架與NIR-II光熱治療DBIs
圖4. SFT-B Gel作為組織工程支架與體內(nèi)NIR-II光熱治療DBIs
SFT-B Gel作為組織工程支架具有良好的生物相容性。如圖4B-D所示,與SF Sol、SFT Sol和TTP-B12相比,SFT-B Gel顯示出與絲素-單寧酸水凝膠(SF-TA Gel)相同的促進(jìn)細(xì)胞遷移和細(xì)胞增殖的能力,說明SFT-B Gel適用于體內(nèi)抗感染治療。隨后,如圖4A方案所示,建立小鼠皮下DBIs模型進(jìn)行了體內(nèi)深層光熱治療。如圖4E所示,小鼠皮下注射混有S. aureus菌液的SFT-B Gel后,隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加,觀察到感染部位出現(xiàn)明顯的顏色變化。之后,在1064 nm激光照射(1.0 W/cm2,5 min)下,SFT-B★ Gel Light組小鼠膿腫部位溫度顯著升高至56.0 ℃(圖4F,G),而其他對(duì)照其溫度變化不明顯。最后,經(jīng)SFT-B★ Gel Light組處理后的膿腫部位快速愈合,在第10天創(chuàng)口基本愈合完全。相應(yīng)地,如圖4K-O所示,各組處理后的感染部位組織液細(xì)菌平板及組織切片進(jìn)一步證實(shí)了SFT-B Gel作為DBIs實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)水凝膠敷料和組織工程支架具有突出的臨床應(yīng)用潛在價(jià)值。
小結(jié)
該工作是團(tuán)隊(duì)近期利用離液效應(yīng)制備實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)細(xì)菌感染和NIR-II深層光熱治療DBIs的可注射水凝膠的最新進(jìn)展。該方法采用絲素蛋白(SF)、甲基化三嗪(TPT3+)和超離液陰離子(B12H122-)構(gòu)建了一種新型的細(xì)菌響應(yīng)可注射水凝膠(SFT-B Gel)。SFT-B凝膠在DBIs微環(huán)境下表現(xiàn)出顯著的細(xì)菌響應(yīng)行為,顏色變化明顯(從白色到黑色),并且在NIR-II(1064 nm)激光照射下具有顯著的光熱效果。此外,SFT-B Gel還具有突出的生物相容性和自降解能力,可以作為組織工程支架促進(jìn)DBIs傷口愈合。
原文鏈接:https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.nanolett.4c00860
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