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安徽大學(xué)楊雪峰、華南理工大學(xué)邊黎明 Adv. Mater.:基于凝聚作用構(gòu)筑具有自進(jìn)化大孔結(jié)構(gòu)的超分子水凝膠用于3D多細(xì)胞球培養(yǎng)
2023-03-23  來源:高分子科技

  在水凝膠中引入大孔隙以形成大孔水凝膠(MPH),能夠支持所負(fù)載細(xì)胞的球形生長增強(qiáng)活力和生物功能。但是現(xiàn)有MPH主要通過模板法、冷凍法和氣體發(fā)泡法等途徑形成,這會(huì)帶來兩個(gè)問題:一、孔隙形成過程不具有細(xì)胞相容性;二、水凝膠的可注射性和孔隙連通性較差,因此無法滿足3D細(xì)胞球培養(yǎng)等生物醫(yī)學(xué)用途的需求。凝聚作用是指均質(zhì)生物大分子(如蛋白質(zhì)和核酸溶液通過-液相分離形成富含大分子濃縮稱為凝聚層)不含大分子的稀釋相的過程,它在精確構(gòu)筑傳統(tǒng)方法難以制備的微結(jié)構(gòu)生物材料上極具前景。


  近日,安徽大學(xué)青年教師楊雪峰博士和華南理工大學(xué)邊黎明教授團(tuán)隊(duì)在利用超分子體系的凝聚作用構(gòu)建MPH方面取得了新進(jìn)展。在該工作中,作者首先設(shè)計(jì)了三種組裝砌塊:()蒽二聚體封端八臂聚乙二醇(PEG8-dimer),()醛基修飾γ-環(huán)糊精(γCD-CHO)和()聚乙烯醇接枝碳酰肼(PVA-CDH)。隨后,三種組裝砌塊的濃溶液可以通過γCD/蒽二聚體主客體作用和腙鍵串聯(lián)連接作用,形具有液體行為的超分子組裝物(SA)。當(dāng)SA暴露在生理介質(zhì)中數(shù)小時(shí)內(nèi),會(huì)因?yàn)槟圩饔眯纬啥嗫啄蹖,?/span>4天后會(huì)進(jìn)一步進(jìn)化為孔徑為~100 μmMPH(圖1由于蒽二聚體自帶藍(lán)色熒光,作者利用激光共聚焦顯微鏡對其形成過程進(jìn)行了跟蹤,并通過重建的三維熒光圖像揭示了MPH互相貫穿性大孔結(jié)構(gòu)。此外作者還證實(shí),SA的凝聚行為和所形成MPH的孔隙形貌可以通過調(diào)節(jié)聚合物濃度、腙鍵密度、主客體對密度和聚合物親水性等參數(shù)進(jìn)行靈活調(diào)控。


  然后,作者通過一系列研究揭示了MPC形成的機(jī)制:當(dāng)SA暴露在生理介質(zhì)中時(shí),外界的水會(huì)因?yàn)闈B透壓差不斷擴(kuò)散到兩親性的SA網(wǎng)絡(luò)中,當(dāng)超出其親水部分的保水能力后,多余的水會(huì)從超分子網(wǎng)絡(luò)中分離出來,從而誘導(dǎo)形成大孔凝聚層;隨著擴(kuò)散進(jìn)去的水不斷滲出,大孔凝聚液泡尺寸不斷增大,而圍繞在液泡周圍動(dòng)態(tài)超分子網(wǎng)絡(luò)則會(huì)在未包合蒽二聚體的疏水作用驅(qū)動(dòng)下不斷凝聚,形成越來越致密的孔壁;最終,這些致密而堅(jiān)固的孔壁導(dǎo)致大孔凝聚層向MPC轉(zhuǎn)變,并限制了液泡的進(jìn)一步增長,從而保持了所獲得MPH的穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。 


1基于γCD/蒽二聚體主客體作用的超分子組裝物通過凝聚作用形成大孔水凝膠的示意圖。


  最后,作者證實(shí)了這種源自液體SA的、具有自進(jìn)化大孔結(jié)構(gòu)的MPH,可以作為一種可注射性大孔支架材料用于干細(xì)胞3D培養(yǎng)。有趣的是,隨著SA進(jìn)化為MPH過程中,封裝在SA中的小鼠胚胎干細(xì)胞(mESCs)和人體間充質(zhì)干細(xì)胞(hMSCs)會(huì)停留在孔壁處,原位生長成尺寸分別為79.2110.8 μm3D多細(xì)胞球體,從而增強(qiáng)其干性保持和軟骨分化能力(圖2)。作為對照,具有同SA相似初始力學(xué)性能的無孔靜態(tài)水凝膠,則不能支持干細(xì)胞的成球化生長和相關(guān)功能。這項(xiàng)工作的發(fā)現(xiàn)不僅為具有自進(jìn)化結(jié)構(gòu)的生物材料的設(shè)計(jì)提供了有價(jià)值的指導(dǎo),而且為3D多細(xì)胞球體培養(yǎng)和其他多樣化的生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用提供了有前景的策略。 


2具有自進(jìn)化大孔結(jié)構(gòu)的MPH能夠促進(jìn)干細(xì)胞的成球化生長及其相關(guān)生物學(xué)功能。


  該研究成果以Coacervation-Mediated Cytocompatible Formation of Supramolecular Hydrogels with Self-evolving Macropores for 3D Multicellular Spheroid Culture”為題發(fā)表在材料領(lǐng)域頂級期刊《Adv. Mater.》上(DOI: 10.1002/adma.202300636)。安徽大學(xué)青年教師楊雪峰博士、香港中文大學(xué)楊伯光鄧穎瑞博士及博士生謝憲為共同第一作者,華南理工大學(xué)趙鵬超邊黎明教授為共同通訊作者。該研究工作得到了國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃、安徽省自然科學(xué)基金和香港特區(qū)政府相關(guān)基金的資助。


  原文鏈接:https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1002/adma.202300636


作者簡介


  邊黎明教授2021年獲聘教育部長江學(xué)者特聘教授,入職華南理工大學(xué)生物醫(yī)學(xué)科學(xué)與工程學(xué)院,現(xiàn)任學(xué)院副院長。邊教授長期致力于發(fā)展先進(jìn)納米材料與水凝膠材料在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用,并且逐漸建立了從基礎(chǔ)材料學(xué),生物醫(yī)學(xué)研究到醫(yī)療應(yīng)用研究的多方向的深度研究。邊教授團(tuán)隊(duì)近期在國際高水平學(xué)術(shù)期刊上發(fā)表論文數(shù)十篇,相關(guān)詳細(xì)內(nèi)容可查閱邊教授實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)站:https://www.x-mol.com/groups/bian_lab


  楊雪峰博士為安徽大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院高層次引進(jìn)人才,碩士生導(dǎo)師,主要從事再生醫(yī)學(xué)用生物材料研究,2006-2013年畢業(yè)于合肥工業(yè)大學(xué)高分子系(導(dǎo)師:丁運(yùn)生教授),2017年于武漢大學(xué)高分子系獲得博士學(xué)位(導(dǎo)師:張俐娜院士),2018-2021年于香港中文大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程系從事博士后研究(合作導(dǎo)師:邊黎明教授),近年在Advanced Materials, Advanced Functional Materials, Carbohydrate Polymers等期刊發(fā)表論文10余篇。

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