作為最常見和最重要的蛋白質(zhì)翻譯后修飾類型之一,可逆的磷酸化修飾在調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂、信號(hào)傳導(dǎo)等復(fù)雜生命過程扮演著至關(guān)重要的作用。但是由于磷酸化蛋白質(zhì)及磷酸肽的豐度相對(duì)較低,且其質(zhì)譜響應(yīng)信號(hào)易受到非磷酸肽的抑制,目前對(duì)其研究仍存在較多困難。
復(fù)旦大學(xué)汪長(zhǎng)春教授課題組與陸豪杰教授課題組合作成功開發(fā)了一種固定四價(jià)鈦離子(Ti4+)的新型磁性復(fù)合微球用于磷酸肽的高效富集,此方法克服了之前無法獲得高純金屬磷酸鹽、四價(jià)金屬離子固載量不高以及磁響應(yīng)速度慢等問題。由于具有極高的金屬磷酸鹽表層密度和鈦離子含量(4.1 wt%),用此方法制備出的復(fù)合微球可以快速從摩爾比高達(dá)500:1(非磷酸肽:磷酸肽)的混合體系中將低豐度的磷酸肽快速選擇性地分離出來,表現(xiàn)出了很高的磷酸肽富集特異性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步證明該富集材料還具有很高的富集靈敏度(低至fmol量級(jí))和多肽回收率(87 %)。作者還選用牛奶和人血清進(jìn)行了復(fù)雜樣本實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明此材料對(duì)于富集復(fù)雜生物樣本中低豐度的磷酸肽同樣具有很高的選擇性及富集效率。該研究工作以馬萬福為第一作者發(fā)表在Adv. Funct. Mater. 2013, 23, 107–115上,并被Wiley中國報(bào)道(http://www.materialsviewschina.com/2012/08/efficient–enrichment -of-phosphorylated-peptides-nanotechnology-and-new-materials/)。
新型磁性復(fù)合微球的制備路線及磷酸肽高效富集策略
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