80电影天堂网,少妇高潮一区二区三区99,jαpαnesehd熟女熟妇伦,无码人妻精品一区二区蜜桃网站

  化療因其無(wú)創(chuàng)傷性、普遍性和全身治療性，一直是腫瘤臨床治療的主要方式之一。但化療藥物通常具有疏水性、不穩(wěn)定性、藥代動(dòng)力學(xué)差、生物利用度低、非靶向特異性等特點(diǎn)，從而導(dǎo)致治療效果不理想和全身毒副作用。同時(shí)，單一化療難以應(yīng)對(duì)腫瘤的復(fù)雜性和異質(zhì)性，易導(dǎo)致腫瘤耐藥和復(fù)發(fā)。目前，提高化療療效主要有兩種策略：一方面，開(kāi)發(fā)納米級(jí)給藥系統(tǒng)，在腫瘤部位富集藥物，從而降低對(duì)正常組織的毒性，提高抗腫瘤療效；另一方面，通過(guò)雙藥/多藥介導(dǎo)的聯(lián)合化療或化療與其他治療方式的協(xié)同，顯著提高腫瘤治療效果。

  化學(xué)動(dòng)力學(xué)療法（CDT）在腫瘤特異性治療中具有優(yōu)勢(shì)。同時(shí)，CDT可破壞癌細(xì)胞的氧化還原平衡，降低其抗氧化能力，從而增加癌細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性。過(guò)渡金屬離子可與腫瘤微環(huán)境（TME）中的過(guò)氧化氫（H₂O₂）發(fā)生芬頓或類(lèi)芬頓反應(yīng)生成劇毒的羥基自由基（×OH），通過(guò)CDT誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡。特別是，鐵離子（Fe³⁺）可消耗TME中的谷胱甘肽（GSH），并產(chǎn)生亞鐵離子（Fe²⁺）。Fe³⁺和生成的Fe²⁺都會(huì)進(jìn)一步與TME中的H₂O₂反應(yīng)生成×OH，從而降低抗氧化能力，并增強(qiáng)癌細(xì)胞的CDT。有趣的是，Fe³⁺介導(dǎo)的GSH氧化和Fe²⁺介導(dǎo)的芬頓反應(yīng)的聯(lián)合可以在Fe³⁺和Fe²⁺之間形成了一個(gè)循環(huán)，持續(xù)消耗GSH并產(chǎn)生活性氧（ROS），從而增強(qiáng)癌癥治療效果。

  棉酚（Gos）是一種天然多酚化合物，因其強(qiáng)大的抗腫瘤活性而被視為一種潛在的化療藥物。Gos不僅能引起線粒體功能障礙，還能直接與抗凋亡蛋白Bcl-2結(jié)合，抵消其抗凋亡作用，從而引發(fā)癌細(xì)胞凋亡。與正常細(xì)胞不同，癌細(xì)胞受到持續(xù)的氧化應(yīng)激（OS）和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ERS）的影響。因此，Gos介導(dǎo)的化療和ROS依賴(lài)性CDT的協(xié)同治療有望放大OS，從而提高治療效果。此外，IRE1a-X-box結(jié)合蛋白1（XBP1）作為ERS的關(guān)鍵傳感器和反應(yīng)器，被研究用于促進(jìn)腫瘤治療。即癌細(xì)胞能激活IRE1a來(lái)剪接XBP1并形成剪接的XBP1（XBP1s），從而適應(yīng)ERS并存活下來(lái)。作為一種天然腺苷類(lèi)似物，豐加霉素（Toy）能夠阻斷IRE1a-XBP1通路來(lái)加劇ERS并誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡，從而顯示出良好的抗腫瘤活性。因此，將Gos誘導(dǎo)的線粒體功能障礙和ROS生成、Toy加劇的ERS和Fe³⁺介導(dǎo)的CDT整合在一起，有望為高效治療腫瘤提供一種充滿前景的方法。

  “All-in -one”納米平臺(tái)已經(jīng)被用于有效遞送化療藥物。然而，輔料或載體帶來(lái)的低藥物負(fù)載率、免疫原性和毒性等挑戰(zhàn)對(duì)納米藥物的臨床轉(zhuǎn)化構(gòu)成了重大障礙。有趣的是，通過(guò)活性成分自組裝構(gòu)建的無(wú)載體全活性納米平臺(tái)具有巨大的優(yōu)勢(shì)，包括改善藥物輸送、增強(qiáng)腫瘤治療效果和減少毒副作用。最近，由金屬離子和多酚化合物自組裝而成的金屬酚類(lèi)納米材料正在成為一種全活性納米藥物，并具有良好的抗腫瘤效果和臨床轉(zhuǎn)化潛力。特別是Fe³⁺很容易與多酚化合物配位自組裝形成金屬酚納米材料，受益于Fe³⁺的高r₁弛豫率和芬頓反應(yīng)的催化活性，其T₁MR成像和CDT療效極佳。因此，將Gos、Fe³⁺和Toy自組裝成金屬酚納米藥物有望促進(jìn)高效精準(zhǔn)的腫瘤治療。

  此外，單獨(dú)化療或CDT已被證實(shí)可誘導(dǎo)免疫原性細(xì)胞死亡（ICD）以激活抗腫瘤免疫響應(yīng)，因?yàn)榘l(fā)生ICD的腫瘤細(xì)胞可釋放損傷相關(guān)分子模式（DAMPs）使樹(shù)突狀細(xì)胞（DCs）成熟，從而激活細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞。然而，腫瘤細(xì)胞表面表達(dá)的程序性細(xì)胞死亡配體1（PD-L1）會(huì)通過(guò)逃避免疫監(jiān)視而導(dǎo)致T細(xì)胞失活或衰竭。為應(yīng)對(duì)這一問(wèn)題，PD-L1抗體（A-PD-L1）已被用于通過(guò)免疫檢查點(diǎn)阻斷（ICB）恢復(fù)T細(xì)胞的活性，從而激活全身性抗腫瘤免疫。

圖1. GFT NCs的微流控合成及其腫瘤診療應(yīng)用示意圖。

  顯然，納米藥物的可重復(fù)性制備和均一理化特性是其臨床轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵因素。 然而，傳統(tǒng)的濕化學(xué)合成方法由于無(wú)法精確控制合成過(guò)程，往往難以制備出具有良好均一性和穩(wěn)定性的高質(zhì)量納米藥物，而微流控技術(shù)由于能夠通過(guò)控制反應(yīng)流體、流量比（FRR）和反應(yīng)動(dòng)力學(xué)來(lái)精確控制納米平臺(tái)的粒度、形態(tài)和組分，因此在制備高質(zhì)量納米材料方面具有極大的優(yōu)越性。因此，采用微流控技術(shù)制備一系列基于金屬有機(jī)框架、脂質(zhì)、凝膠和礦化腫瘤細(xì)胞的高質(zhì)量納米藥物用于癌癥治療至關(guān)重要。此外，S形通道還有助于流體的充分混合。因此，微流體技術(shù)有望實(shí)現(xiàn)一步可控制備全活性金屬酚納米藥物。

圖2. GFT NCs的表征。（A）GFT NCs的TEM圖像；（B）GFT NCs的水合粒徑和電勢(shì)；Gos、Toy和GFT NCs的紫外圖譜（C）和紅外圖譜（D）；GFT NCs的XPS圖譜（E）和高分辨率Fe 2p XPS圖譜（F）；GFT NCs在不同pHs磷酸鹽緩沖液中Gos（G）、Fe³⁺（H）和Toy（I）的釋放曲線。

圖3. GFT NCs介導(dǎo)的ROS產(chǎn)生、誘導(dǎo)的線粒體功能障礙和加劇的ERS。（A）不同Gos或Toy濃度的Gos、Toy、GT或GFT NCs處理24 h后4T1細(xì)胞的活力；（B）不同Fe³⁺濃度的Fe³⁺、TF、GF或GFT NCs處理24 h后4T1細(xì)胞的活力；不同處理后，4T1細(xì)胞內(nèi)ROS（C）和GSH（D）的含量；（E）不同處理后，4T1細(xì)胞內(nèi)LPO的積累（細(xì)胞核：藍(lán)色，氧化態(tài)C11-BODIPY^581/591：綠色，和非氧化態(tài)C11-BODIPY^581/591：紅色）；（F）GFT NCs誘導(dǎo)線粒體功能障礙和加劇ERS的示意圖；（G）不同處理6 h后，4T1細(xì)胞內(nèi)線粒體膜電位變化情況；（H）不同處理24 h后，4T1 細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白GRP78、p-IRE1a、XBP1u、XBP1s和CHOP的蛋白質(zhì)印跡分析。

圖4. GFT NCs體外誘導(dǎo)ICD和DCs成熟。（A）不同處理6 h后，4T1細(xì)胞凋亡情況；（B）不同處理24 h后，4T1細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)結(jié)果；不同處理24 h后，4T1細(xì)胞釋放ATP的水平（C）、HMGB1的水平（D）和4T1細(xì)胞膜表面暴露CRT的水平（E）；（F）不同處理24 h后的4T1細(xì)胞和iDCs共培養(yǎng)24 h后，DC成熟情況的流式細(xì)胞術(shù)分析。

圖5. GFT NCs用于4T1腫瘤的MR成像和治療。（A）GFT NCs在不同pH條件下的T₁ MR成像以及r₁弛豫率；尾靜脈注射GFT NCs或Magnevist（[Fe] = 0.4 mg×mL^-1，[Gd] = 0.4 mg×mL^-1，100 mL PBS/每只小鼠）前后不同時(shí)間點(diǎn)腫瘤的活體T₁加權(quán)MR圖像（B）及對(duì)應(yīng)的信噪比（SNR）（C）；（D）GFT+A-PD-L1的體內(nèi)聯(lián)合治療示意圖；不同治療14天后，小鼠的相對(duì)腫瘤體積變化曲線（E）和腫瘤代表性照片（F）；不同治療30天后，小鼠的生存率變化曲線（G）和不同治療14天后小鼠的相對(duì)體重變化曲線（H）；（I）不同治療14天后，小鼠腫瘤組織切片的H&E、TUNEL和Ki-67染色情況；不同治療14天后，小鼠肺的代表性照片（J）、肺轉(zhuǎn)移腫瘤結(jié)節(jié)定量分析（K）和肺組織切片的H&E染色情況（L）。

圖6. GFT NCs聯(lián)合A-PD-L1的抗腫瘤免疫應(yīng)答和腫瘤特異性免疫記憶效應(yīng)。不同治療14天后，小鼠腫瘤組織切片的CD80⁺和CD86⁺ DCs的免疫熒光染色情況（A）、CD4⁺ T細(xì)胞和CD8⁺ T細(xì)胞的免疫熒光染色情況（B），小鼠腫瘤部位的CD4⁺ T細(xì)胞和CD8⁺ T細(xì)胞的比例（C）、免疫抑制Tregs（CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ T 細(xì)胞）的比例（D），小鼠血清中IL-6（E）、TNF-a（F）和IFN-g（G）的細(xì)胞因子水平；（H）免疫記憶效應(yīng)的驗(yàn)證示意圖；（I）不同治療11天后小鼠脾臟中T_CM（CD44⁺CD62L⁺ T細(xì)胞，門(mén)控CD8⁺ T細(xì)胞）和T_EM（CD44⁺CD62L^-T細(xì)胞，門(mén)控CD8⁺ T細(xì)胞）的比例；（J）不同治療26天后，小鼠再挑戰(zhàn)腫瘤中CD4⁺/CD8⁺ T細(xì)胞的比例。

  簡(jiǎn)言之，該研究設(shè)計(jì)的GFT納米藥物的主要優(yōu)勢(shì)在于以下幾個(gè)方面：1）通過(guò)一步微流控法制備得到高質(zhì)量的無(wú)載體全活性GFT NCs，可在T₁ MR成像引導(dǎo)下將Gos、Fe³⁺和Toy共同遞送至腫瘤部位；2）Gos誘導(dǎo)的線粒體功能障礙、Toy加劇的ERS和Fe³⁺介導(dǎo)的CDT相結(jié)合，放大了ICD效應(yīng)，產(chǎn)生了全身抗腫瘤免疫；3）GFT NCs聯(lián)合A-PD-L1，可通過(guò)重塑腫瘤免疫微環(huán)境和長(zhǎng)期腫瘤特異性免疫記憶作用，高效治療腫瘤并抑制腫瘤轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)。

  文章鏈接：https://doi.org/10.1002/adfm.202417070