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武漢大學(xué)常春雨/湖北大學(xué)張冬卉課題組《Small》:利用納米纖維素的有序排列實現(xiàn)心肌細(xì)胞的可視化監(jiān)控
2022-09-15  來源:高分子科技

  纖維素納米晶體在剪切力的作用下,形成高度有序的排列,在正交偏振片下呈現(xiàn)均勻的干涉色。這種干涉色源于各向異性材料在垂直和平行于取向方向產(chǎn)生兩束偏振光的相位差。該相位差與材料厚度、折射率差(雙折射率)和入射光波長相關(guān)。因此,當(dāng)材料厚度和雙折射率發(fā)生變化時,會產(chǎn)生相位差的變化,進(jìn)而改變干涉色。


  近期,武漢大學(xué)常春雨教授課題組湖北大學(xué)張冬卉教授課題組合作將剪切取向的海鞘纖維素納米晶體(TCNC)固定在水凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)中,利用心肌細(xì)胞收縮/舒張引起水凝膠干涉色變化的特性,將其用于心肌細(xì)胞的可視化監(jiān)控。該工作以“Micropatterned Hydrogels with Highly Ordered Cellulose Nanocrystals for Visually Monitoring Cardiomyocytes”為題發(fā)表在《Small》上。


  將TCNC在凝膠預(yù)聚液中剪切取向,利用光掩膜紫外光引發(fā)聚合制備表面具有條紋凹槽結(jié)構(gòu)的各向異性水凝膠薄膜(圖1)。將心肌細(xì)胞接種水凝膠薄膜表面,誘導(dǎo)其定向生長。在心肌細(xì)胞收縮/舒張過程中,水凝膠懸臂發(fā)生形變,引起水凝膠干涉色同步變化,通過結(jié)合微區(qū)光譜儀監(jiān)測心肌細(xì)胞的變化。此外,水凝膠的每個懸臂均可實現(xiàn)微型化,為體外高通量可視化檢測心肌細(xì)胞收縮力提供可能。 


圖1. TCNC基水凝膠表面微圖案制備示意圖


  水凝膠表面為緊密堆積、定向排列的納米纖維,2D XRD證明TCNC在水凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)具有高度取向結(jié)構(gòu)。3D光學(xué)輪廓儀顯示TCNC基水凝膠表面凹槽尺寸較為均勻,有明顯高度差,凹凸面的寬度、凹面的寬度、凹面的深度分別為25 ± 5, 21 ± 4, and 3 ± 0.4 μm。在水凝膠表面培養(yǎng)心肌細(xì)胞后,隨著細(xì)胞收縮,光學(xué)水凝膠彎曲TCNC排列發(fā)生改變產(chǎn)生光程差,干涉色由藍(lán)色變?yōu)榫G色、黃色和紅色。心肌細(xì)胞收縮力越大,干涉色顏色變化范圍越大。同時,使用微區(qū)光譜儀分析心肌細(xì)胞在電場及藥物刺激下的實時變化,實現(xiàn)對心肌細(xì)胞的收縮頻率的定量檢測。通過這種非侵入細(xì)胞的手段,可以減少組織毒性,延長對細(xì)胞的監(jiān)測時間(圖2)。 


2.TCNC光學(xué)水凝膠對心肌細(xì)胞實時檢測。


  為提高測試效率并增加獨立疾病模型的數(shù)量,設(shè)計出一種多腔室裝置,通過對光掩膜尺寸改變,縮小了每片凝膠懸臂的大小,使用相同面積的光掩模,能夠制作出更多的微型水凝膠懸臂,并為微型水凝膠懸臂做出了適配的高通量腔室,能同時檢測更多的心肌細(xì)胞的收縮舒張情況,且利用硅膠進(jìn)行隔離的腔室之間互不干擾,能同時測試不同培養(yǎng)條件下的心肌細(xì)胞收縮功能,為新型心臟器官芯片的研發(fā)提供了實驗基礎(chǔ)(圖3)。 


3多腔室藥物篩選裝置。


  本工作提出一種簡單且有效的策略制備功能性水凝膠,其表面具有微圖案化、內(nèi)部包含有序的納米纖維素。心肌細(xì)胞的自主搏動可以驅(qū)動水凝膠懸臂同步變形,引起水凝膠干涉色周期性變化,從而實現(xiàn)心肌細(xì)胞收縮力的可視化。為更高效的對心肌細(xì)胞進(jìn)行評估,將上述水凝膠微型化后集成到高通量設(shè)備內(nèi),形成一個多腔室大規(guī)模的系統(tǒng),能在同一視野下實時監(jiān)測多組心肌的收縮力的變化,提高檢測效率。本工作不僅為體外心肌細(xì)胞研究提供了新思路,也為單個心肌細(xì)胞檢測和體外心臟組織工程可視化檢測提供了可能。


  本論文的第一作者為武漢大學(xué)化學(xué)與分子科學(xué)學(xué)院博士生王君玫,目前在贛南師范大學(xué)工作,共同第一作者為湖北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院研究生劉倩,通訊作者為武漢大學(xué)常春雨教授和湖北大學(xué)張冬卉教授。該研究得到國家自然科學(xué)基金委的支持。


  全文鏈接:https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/smll.202202235

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