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吉林大學(xué)胡良海教授課題組 Angew:磷脂分子在油/水界面的定向組裝印跡及其對外泌體與細(xì)胞質(zhì)膜的識別
2023-04-28  來源:高分子科技

  磷脂是細(xì)胞膜的重要組成部分,磷脂雙分子層不僅起著天然的屏障作用,還在物質(zhì)與信息傳遞、細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和免疫應(yīng)答等方面發(fā)揮重要的功能,同時也反應(yīng)了細(xì)胞的生理病理狀態(tài),如磷脂酰絲氨酸正常分布在細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè),在細(xì)胞凋亡時其會外翻至細(xì)胞膜的表面,已成為細(xì)胞凋亡檢測的重要標(biāo)志物。因此,通過細(xì)胞膜上的脂類分子對生物膜進(jìn)行選擇性識別,對細(xì)胞成像、分選、靶向、調(diào)控等有著重要的意義。


  作為一類呈鏈狀分布的兩親性化合物,磷脂分子脂肪鏈的柔性和疏水性,使得對其在分子層面識別尤為困難,如能利用化學(xué)的手段對脂質(zhì)分子進(jìn)行高選擇性識別,將有力推動對細(xì)胞膜的認(rèn)知與調(diào)控。分子印跡作為一種人工抗體制備方法已在生物醫(yī)藥、環(huán)境催化等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用,現(xiàn)有的分子印跡方法都無法實(shí)現(xiàn)對兩親性磷脂的有效印跡。


圖1.磷脂分子表位印跡及其對質(zhì)膜識別的示意圖。


  針對兩親性磷脂分子特點(diǎn),吉林大學(xué)超分子化學(xué)生物學(xué)研究中心胡良海教授課題組開發(fā)了一種基于反相微乳液體系的磷脂分子印跡策略(圖1。在該體系中,兩親性的磷脂分子可在油-水界面進(jìn)行有序的自組裝排列,從而實(shí)現(xiàn)對磷脂親水表位基團(tuán)的分子印跡。將所制備的磷脂酰絲氨酸印跡材料用于對凋亡細(xì)胞進(jìn)行識別和示蹤,流式細(xì)胞儀和激光共聚焦顯微鏡分析顯示,該材料具有和Annexin-V相近的標(biāo)記效率(圖2,表明了脂質(zhì)靶向的印跡材料具有高度的配體-受體選擇識別性能,為細(xì)胞成像與靶向藥物遞送提供了新的手段。 


圖2.磷脂分子印跡材料對凋亡細(xì)胞的識別。


  外泌體是細(xì)胞分泌的具有磷脂雙分子層膜包裹的囊泡狀結(jié)構(gòu)小體,與疾病的發(fā)生發(fā)展有著密切的聯(lián)系,是疾病標(biāo)志物篩選的重要來源。因此,磷脂分子印跡材料可通過外泌體外膜表達(dá)的磷脂對其進(jìn)行選擇性分離,和傳統(tǒng)超速離心方法相比,該方法顯示出更高的回收率和特異性(圖3。通過對富集的外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)分析,所鑒定到的蛋白中73%來源于外泌體數(shù)據(jù)庫,且Top100蛋白中有91個被鑒定到,Gene Ontology分析表明所鑒定到的絕大多數(shù)是細(xì)胞外囊泡蛋白,表明了該方法的可靠性和適用性,為基于外泌體的腫瘤液體活檢提供了新的技術(shù)方案。 


3.磷脂分子印跡材料與傳統(tǒng)超速離心法對外泌體富集的比較。


  這種全新的分子印跡策略為生物膜的標(biāo)記與調(diào)控提供了特有的化學(xué)生物學(xué)手段,針對細(xì)胞膜上脂質(zhì)分子的分布特征,可對不同生理狀態(tài)下的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的精細(xì)變化進(jìn)行分辨和干預(yù),為生物成像、藥物遞送與疾病診斷提供了新的分子工具。相關(guān)研究作為“Hot Paper”發(fā)表Angew. Chem. Int. Ed. (Epitope Imprinting of Phospholipids by Oriented Assembly at the Oil/Water Interface for the Selective Recognition of Plasma Membranes)。


  吉林大學(xué)2019博士研究生周俊濤2020博士研究生程顯惠為論文的第一作者,吉林大學(xué)胡良海教授和南京大學(xué)劉震教授為論文的通訊作者。本研究得到了國家自然科學(xué)基金和吉林大學(xué)超分子化學(xué)生物學(xué)研究中心的支持。


  原文鏈接:https://doi.org/10.1002/anie.202213938

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